記事ID ： 550

新しいP2Y12アンタゴニスト薬の開発、検証に血小板 VASP／P2Y12アンタゴニスト活性測定キット

メーカー名：BioCytex SARL

血小板ADP のレセプター（P2Y12）のアンタゴニストであるThienopyridine 及びそのアナログを、フローサイトメトリーで測定・モニタリングするためのキットです。

本商品は研究用試薬です。

背景

ADPは血液凝固において重要な因子の1つであり、ADP の受容体であるP2Y1とP2Y12（共にGタンパク質結合受容体）を介して血小板の活性化を促します。P2Y1はADPによる凝固反応に重要な役割を果たし、P2Y12は凝集反応の完了とさらなる凝集の引き金となります。

ASP（血管拡張因子刺激リン酸化タンパク質）は、細胞内血小板タンパク質で、基本状態ではリン酸化されていません。VASPのリン酸化は、cAMP経路によって調節されています。この経路は、PGE1（プロスタグランジン1）によって活性化される（図1-(1)）一方、受容体であるP2Y12を介してADPにより阻害されます（図1-(2)）。

原理

本商品の測定条件では、受容体P2Y12の阻害によりVASPがリン酸化され、逆に受容体P2Y12が活性化されるとADPがPGE1の働きを抑制し、VASP-Pを非リン酸化状態のVASPにします。PGE1により誘導されるVASP のリン酸化の持続を測ることで、ex vivoでのThienopyridine の効能を検証することができます（図1-(3)）。また、in vitroにおける受容体P2Y12のアンタゴニストの効果を検証することもできます。

図1　VASPのリン酸化の模式図

測定方法

平均蛍光強度値（MFIc）から、下記の計算式に従い、血小板反応性指標（PRI；platelet reactivity index）を算出します。
PRI＝[(MFIc（PEG1）−MFIc（PEG1＋ADP）)/MFIc（PEG1）]×100
MFIc（PEG1）：PGE1のみ存在下のMFIc
MFIc（PEG1＋ADP）：PGE1及びADP存在下のMFIc

図2　P2Y12（ADPレセプター）アンタゴニストのモニタリング方法